В главное отличие между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной заключается в том, что Нитроцеллюлозная мембрана имеет высокое сродство к связыванию с белками, тогда как нейлоновая мембрана имеет высокое сродство к связыванию нуклеиновых кислот. Кроме того, гидрофобные и электростатические взаимодействия связывают макромолекулы с нитроцеллюлозными мембранами, в то время как ионные, гидрофобные и электростатические взаимодействия связывают макромолекулы с нейлоновыми мембранами.

Нитроцеллюлоза и нейлоновая мембрана - это два типа мембран, на которые макромолекулы переносятся из геля. Однако мембраны из нитроцеллюлозы также можно использовать для связывания ДНК и РНК.

Affinity, Biodyne A, Biodyne B, Нитроцеллюлоза, Нуклеиновые кислоты, Нейлон, Размер пор, Белки

Что такое нитроцеллюлозная мембрана

Нитроцеллюлозная мембрана представляет собой обычную матрицу, используемую в вестерн-блоттинге из-за высокой аффинности связывания с белками. Однако его можно использовать для обнаружения нуклеиновых кислот помимо иммобилизованных белков и гликопротеинов. Иммобилизация макромолекул в основном происходит за счет гидрофобных взаимодействий. Водородные связи образуются также между нитрогруппами мембраны и аминокислотными боковыми цепями белков. Иммобилизация белка будет высокой при высоких концентрациях соли и низких концентрациях метанола.

Рисунок 1: Принцип блоттинга

Нитроцеллюлозные мембраны доступны в 100% чистых формах нитроцеллюлозы с большой площадью поверхности, которая является однородной. Доступные предварительные размеры: 0,2 мкм и 0,45 мкм. Небольшой размер пор лучше для связывания с небольшими белками (<14 кДа). Связывающая и удерживающая способность белков 80-250 мкг / см.². Предварительно собранные мембраны готовы к использованию. Одним из главных преимуществ нитроцеллюлозных мембран является их очень низкий фон, так как они легко блокируются. Нитроцеллюлозные мембраны на подложке можно снимать и повторно проверять.

Что такое нейлоновая мембрана

Нейлоновая мембрана - широко используемая матрица для связывания нуклеиновых кислот. Нейлоновые мембраны механически прочнее нитроцеллюлозных мембран. Два основных типа нейлоновых мембран, используемых при блоттинге, - это Biodyne A и Biodyne B. Размер пор обоих типов составляет 0,45 мкм. Они устойчивы к нагреванию и растворителям. Кроме того, они не сжимаются, не трескаются и не рвутся. Оба дают более низкий фон, чем нитроцеллюлозные мембраны.

Рисунок 2: Мембрана саузерн-блоттинга

Сходства между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной

Разница между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной

Определение

Нитроцеллюлозная мембрана относится к липкой мембране, используемой для иммобилизации нуклеиновых кислот и белков при блоттинге, в то время как нейлоновая мембрана относится к типу мембраны с высокой прочностью и термостойкостью, используемой для иммобилизации макромолекул.

Состоит из

Нитроцеллюлозные мембраны состоят из нитрированной целлюлозы, в то время как нейлоновые мембраны состоят из немодифицированного или положительно заряженного нейлона Biodyne A и Biodyne B.

Размер пор

Размеры пор нитроцеллюлозных мембран составляют 0,2 мкм и 0,45 мкм, в то время как размер пор нейлоновых мембран составляет 0,45 мкм.

Сила

Нитроцеллюлозные мембраны хрупкие и поэтому не могут использоваться повторно, в то время как нейлоновые мембраны обладают механической прочностью.

Способ передачи

Электрофоретический перенос в основном используется при переносе белков на нитроцеллюлозные мембраны, в то время как капиллярный перенос является обычной практикой для нейлоновых мембран.

Близость

Нитроцеллюлозные мембраны имеют высокое сродство к белку, тогда как нейлоновые мембраны имеют высокое сродство к нуклеиновым кислотам. Нитроцеллюлозные мембраны также можно использовать для нуклеиновых кислот.

Промокание

Нитроцеллюлозные мембраны лучше подходят для вестерн-блоттинга, в то время как нейлоновые мембраны лучше для саузерн-блоттинга и нозерн-блоттинга.

Связывающие взаимодействия

Гидрофобные и электростатические взаимодействия связывают макромолекулы с нитроцеллюлозными мембранами, в то время как ионные, гидрофобные и электростатические взаимодействия связывают макромолекулы с нейлоновыми мембранами.

Связывающая способность с белками

Связывающая способность нитроцеллюлозной мембраны с белками составляет 80-250 мкг / см.² в то время как белок-связывающая способность нейлоновой мембраны составляет 150-200 мкг / см².

Заключение

Нитроцеллюлозная мембрана - это хрупкая мембрана, которая в основном используется для иммобилизации белка при вестерн-блоттинге, в то время как нейлоновая мембрана представляет собой прочную мембрану, которая в основном используется для иммобилизации нуклеиновых кислот. Мембраны из нитроцеллюлозы связывают молекулы посредством гидрофобных взаимодействий, а мембраны из нейлона связывают молекулы посредством электростатических взаимодействий. Следовательно, основное различие между нитроцеллюлозой и нейлоновой мембраной - это сродство.

Ссылка:

1. «Нитроцеллюлозные мембраны для вестерн-блоттинга | Thermo Fisher Scientific - LK ». Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, доступно здесь 2. «Нейлоновая мембрана Biodyne A, 0,45 м, 8 см x 12 см». Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, доступно здесь 3. «Нейлоновая мембрана Biodyne B, 0,45 м, 8 см x 12 см». Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, доступны здесь

Изображение предоставлено:

1. «Блот-биология» Gbdivers - собственная работа (CC BY-SA 3.0) через Commons Wikimedia2. «Саузерн-блот-мембрана» Боян Чунар - собственная работа (CC BY-SA 4.0) через Commons Wikimedia